Ang mga protina sa DELLA gipreserbarmga regulator sa pagtubonga adunay dakong papel sa paglambo sa tanom isip tubag sa internal ug external nga mga signal. Isip transcriptional regulators, ang mga DELLA motapot sa mga transcription factor (TFs) ug histone H2A pinaagi sa ilang GRAS domains ug girekrut aron molihok sa mga promoter. Ang bag-ong mga pagtuon nagpakita nga ang kalig-on sa DELLA gi-regulate human sa translation pinaagi sa duha ka mekanismo: polyubiquitination nga gipahinabo sa plant hormonegiberellin, nga mosangpot sa ilang paspas nga pagkadaot, ug conjugation uban sa gamay nga ubiquitin-like modifier (SUMO), nga nagdugang sa ilang akumulasyon. Dugang pa, ang kalihokan sa DELLA dinamikong gi-regulate sa duha ka managlahing mekanismo sa glycosylation: Ang O-fucosylation nagpalambo sa interaksyon sa DELLA-TF, samtang ang O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) nga pagbag-o nagpugong sa interaksyon sa DELLA-TF. Bisan pa, ang papel sa DELLA phosphorylation dili klaro tungod kay ang mga nangaging pagtuon nagpakita og nagkasumpaki nga mga resulta, diin ang uban nagsugyot nga ang phosphorylation nagpasiugda o nagpugong sa pagkadaot sa DELLA ug ang uban nagsugyot nga ang phosphorylation wala makaapekto sa ilang kalig-on. Dinhi, among giila ang mga site sa phosphorylation sa GA1-3 repressor (RGA), AtDELLA, nga giputli gikan sa Arabidopsis thaliana pinaagi sa mass spectrometry ug gipakita nga ang phosphorylation sa duha ka RGA peptides sa mga rehiyon sa PolyS ug PolyS/T nagpalambo sa kalihokan sa RGA pinaagi sa pagpasiugda sa pagbugkos sa H2A ug asosasyon sa RGA sa mga target promoter. Talalupangdon nga ang phosphorylation wala makaapekto sa mga interaksyon sa RGA-TF o kalig-on sa RGA. Ang among pagtuon nagpadayag sa usa ka mekanismo sa molekula diin ang phosphorylation nag-induce sa kalihokan sa DELLA.
Ang among mass spectrometric analysis nagbutyag nga ang Pep1 ug Pep2 parehong taas og phosphorylation sa RGA sa GA-deficient Ga1 background. Gawas pa niini nga pagtuon, ang phosphoproteomic studies nagbutyag usab sa Pep1 phosphorylation sa RGA, bisan kung ang papel niini wala pa gitun-an53,54,55. Sa kasukwahi, ang Pep2 phosphorylation wala pa gihulagway kaniadto tungod kay kini nga peptide makita lamang gamit ang RGAGKG transgene. Bisan kung ang m1A mutation, nga nagwagtang sa Pep1 phosphorylation, gamay ra nga nakakunhod sa kalihokan sa RGA sa planta, kini adunay dugang nga epekto kung giubanan sa m2A sa pagkunhod sa kalihokan sa RGA (Supplementary Figure 6). Importante, ang Pep1 phosphorylation mikunhod pag-ayo sa GA-enhanced sly1 mutant kumpara sa ga1, nga nagsugyot nga ang GA nagpasiugda sa RGA dephosphorylation, nga nakakunhod sa kalihokan niini. Ang mekanismo diin ang GA nagpugong sa RGA phosphorylation nanginahanglan dugang nga imbestigasyon. Usa ka posibilidad mao nga kini makab-ot pinaagi sa regulasyon sa usa ka wala mailhi nga protein kinase. Bisan tuod ang mga pagtuon nagpakita nga ang ekspresyon sa CK1 protein kinase EL1 gipaubos sa GA sa bugas41, ang among mga resulta nagpakita nga ang mas taas nga order mutations sa Arabidopsis EL1 homologue (AEL1-4) wala makapakunhod sa RGA phosphorylation. Subay sa among mga resulta, ang usa ka bag-o nga pagtuon sa phosphoproteomic gamit ang Arabidopsis AEL overexpressing lines ug usa ka ael triple mutant wala makaila sa bisan unsang DELLA proteins isip substrates niining mga kinases56. Sa dihang among giandam ang manuskrito, gitaho nga ang GSK3, ang gene nga nag-encode sa GSK3/SHAGGY-like kinase sa trigo (Triticum aestivum), mahimong mag-phosphorylate sa DELLA (Rht-B1b)57, bisan tuod ang phosphorylation sa Rht-B1b sa GSK3 wala pa makumpirma sa planta. Ang in vitro enzymatic reactions sa presensya sa GSK3 gisundan sa mass spectrometry analysis nagpadayag sa tulo ka phosphorylation sites nga nahimutang taliwala sa DELLA ug GRAS domains sa Rht-B1b (Supplementary Fig. 3). Ang mga serine ngadto sa alanine substitutions sa tanang tulo ka phosphorylation sites miresulta sa pagkunhod sa Rht-B1b activity sa transgenic wheat, subay sa among mga nahibal-an nga ang alanine substitutions sa Pep2 RGA mikunhod sa RGA activity. Bisan pa, ang in vitro protein degradation assays dugang nga nagpakita nga ang phosphorylation mahimo usab nga magpalig-on sa Rht-B1b57. Sukwahi kini sa among mga resulta nga nagpakita nga ang alanine substitutions sa Pep2 RGA wala makausab sa kalig-on niini sa planta. Ang GSK3 sa trigo usa ka ortholog sa brassinosteroid-insensitive protein 2 (BIN2) sa Arabidopsis 57. Ang BIN2 usa ka negatibo nga regulator sa BR signaling, ug ang BR nag-activate sa signaling pathway niini pinaagi sa pagpahinabo sa BIN2 degradation 58. Gipakita namo nga ang pagtambal sa BR wala makapakunhod sa RGA stability 59 o phosphorylation levels sa Arabidopsis (Supplementary Figure 2), nga nagsugyot nga ang RGA dili lagmit nga ma-phosphorylate sa BIN2.
Ang tanang kwantitatibong datos gi-analisar gamit ang Excel, ug ang mga mahinungdanong kalainan gitino gamit ang Student's t-test. Walay gigamit nga mga pamaagi sa estadistika aron mahibal-an daan ang gidak-on sa sample. Walay datos nga wala iapil sa pag-analisar; ang eksperimento wala gi-randomize; ug ang mga tigdukiduki nahibalo sa alokasyon atol sa eksperimento ug pagtimbang-timbang sa resulta. Ang gidak-on sa sample gihatag sa mga leyenda sa hulagway ug sa hilaw nga mga file sa datos.
Oras sa pag-post: Abr-15-2025