Ang mga protina sa DELLA gitipiganmga regulator sa pagtubonga adunay hinungdanon nga papel sa pag-uswag sa tanum agig tubag sa internal ug eksternal nga mga signal. Isip transcriptional regulators, ang DELLAs nagbugkos sa transcription factors (TFs) ug histone H2A pinaagi sa ilang GRAS domains ug gi-recruit aron molihok sa mga tigpasiugda. Gipakita sa bag-ong mga pagtuon nga ang kalig-on sa DELLA gi-regulate pagkahuman sa paghubad pinaagi sa duha nga mga mekanismo: polyubiquitination nga gipahinabo sa hormone sa tanumgibberellin, nga mosangpot sa ilang paspas nga pagkadaot, ug conjugation uban sa gamay nga ubiquitin-like modifier (SUMO), nga nagdugang sa ilang panagtigum. Dugang pa, ang kalihokan sa DELLA dinamikong gikontrol sa duha ka lahi nga mekanismo sa glycosylation: Ang O-fucosylation nagpalambo sa interaksiyon sa DELLA-TF, samtang ang O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) nga pagbag-o nagpugong sa interaksiyon sa DELLA-TF. Bisan pa, ang papel sa DELLA phosphorylation dili klaro tungod kay ang nangaging mga pagtuon nagpakita sa nagkasumpaki nga mga resulta, uban sa pipila nga nagsugyot nga ang phosphorylation nagpasiugda o nagpugong sa DELLA degradation ug ang uban nagsugyot nga ang phosphorylation dili makaapekto sa ilang kalig-on. Dinhi, nahibal-an namon ang mga site sa phosphorylation sa GA1-3 repressor (RGA), AtDELLA, giputli gikan sa Arabidopsis thaliana pinaagi sa mass spectrometry ug gipakita nga ang phosphorylation sa duha ka RGA peptides sa PolyS ug PolyS / T nga mga rehiyon nagpauswag sa kalihokan sa RGA pinaagi sa pagpasiugda sa H2A binding ug RGA nga asosasyon sa mga target nga tigpasiugda. Ilabi na, ang phosphorylation wala makaapekto sa mga interaksyon sa RGA-TF o kalig-on sa RGA. Gipadayag sa among pagtuon ang usa ka mekanismo sa molekula diin ang phosphorylation nag-aghat sa kalihokan sa DELLA.
Ang among mass spectrometric analysis nagpadayag nga ang Pep1 ug Pep2 kay phosphorylated kaayo sa RGA sa GA-kulang nga Ga1 background. Dugang pa niini nga pagtuon, ang phosphoproteomic nga mga pagtuon nagpadayag usab sa Pep1 phosphorylation sa RGA, bisan tuod ang papel niini wala pa gitun-an53,54,55. Sa kasukwahi, ang Pep2 phosphorylation wala pa gihulagway kaniadto tungod kay kini nga peptide makita lamang gamit ang RGAGKG transgene. Bisan kung ang mutation sa m1A, nga nagwagtang sa phosphorylation sa Pep1, gamay ra ang pagkunhod sa kalihokan sa RGA sa planta, kini adunay usa ka additive nga epekto kung giubanan sa m2A sa pagkunhod sa kalihokan sa RGA (Supplementary Figure 6). Mahinungdanon, ang Pep1 phosphorylation hinungdanon nga pagkunhod sa GA-enhanced sly1 mutant kumpara sa ga1, nga nagsugyot nga ang GA nagpasiugda sa RGA dephosphorylation, nga nagpakunhod sa kalihokan niini. Ang mekanismo diin gipugngan sa GA ang RGA phosphorylation nanginahanglan dugang nga imbestigasyon. Ang usa ka posibilidad mao nga kini makab-ot pinaagi sa regulasyon sa usa ka wala mailhi nga protina kinase. Bisan kung gipakita sa mga pagtuon nga ang ekspresyon sa CK1 nga protina kinase EL1 gipaubos sa GA sa rice41, ang among mga resulta nagpakita nga ang mas taas nga order nga mutation sa Arabidopsis EL1 homologue (AEL1-4) dili makapakunhod sa RGA phosphorylation. Sa pag-uyon sa among mga resulta, usa ka bag-o nga pagtuon sa phosphoproteomic gamit ang Arabidopsis AEL nga nag-overexpress nga mga linya ug usa ka ael triple mutant wala makaila sa bisan unsang mga protina sa DELLA isip mga substrate niini nga kinases56. Sa dihang giandam namo ang manuskrito, gikataho nga ang GSK3, ang gene nga nag-encode sa GSK3/SHAGGY-like kinase sa trigo (Triticum aestivum), maka-phosphorylate sa DELLA (Rht-B1b)57, bisan tuod ang phosphorylation sa Rht-B1b ni GSK3 wala pa makumpirma sa planta. Ang in vitro enzymatic nga mga reaksyon sa presensya sa GSK3 nga gisundan sa mass spectrometry analysis nagpadayag sa tulo ka phosphorylation sites nga nahimutang tali sa DELLA ug GRAS nga mga domain sa Rht-B1b (Supplementary Fig. 3). Ang Serine ngadto sa alanine substitutions sa tanang tulo ka phosphorylation sites miresulta sa pagkunhod sa Rht-B1b nga kalihokan sa transgenic nga trigo, nga nahiuyon sa among mga nahibal-an nga ang alanine substitutions sa Pep2 RGA mikunhod sa RGA nga kalihokan. Bisan pa, ang in vitro protein degradation assays dugang nga nagpakita nga ang phosphorylation mahimo usab nga magpalig-on sa Rht-B1b57. Sukwahi kini sa among mga resulta nga nagpakita nga ang alanine substitutions sa Pep2 RGA wala mag-usab sa kalig-on niini sa planta. Ang GSK3 sa trigo usa ka ortholog sa brassinosteroid-insensitive protein 2 (BIN2) sa Arabidopsis 57. Ang BIN2 usa ka negatibo nga regulator sa BR signaling, ug ang BR nagpalihok sa signaling pathway niini pinaagi sa pagpahinabo sa BIN2 degradation 58. Among gipakita nga ang BR nga pagtambal dili makapakunhod sa RGA stability 59 o phosphorylation nga lebel sa Arabidopsis nga dili sama sa RGA2. phosphorylated sa BIN2.
Ang tanan nga quantitative data gisusi sa istatistika gamit ang Excel, ug ang mahinungdanong mga kalainan gitino gamit ang t-test sa Estudyante. Wala'y gigamit nga mga pamaagi sa istatistika aron mahibal-an daan ang gidak-on sa sample. Walay datos nga wala iapil sa pagtuki; ang eksperimento dili random; ug nahibal-an sa mga tigdukiduki ang alokasyon sa panahon sa eksperimento ug pagsusi sa sangputanan. Ang mga sampol nga gidak-on gihatag sa mga leyenda sa numero ug sa hilaw nga mga file sa datos.
Oras sa pag-post: Abr-15-2025