Ang mga protina sa DELLA gikonserba nga mastermga regulator sa pagtubonga adunay sentral nga papel sa pagkontrol sa paglambo sa tanom isip tubag sa mga internal ug environmental cues. Ang DELLA naglihok isip transcriptional regulator ug girekrut aron i-target ang mga promoter pinaagi sa paggapos sa mga transcription factor (TF) ug histone H2A pinaagi sa GRAS domain niini. Ang bag-o nga mga pagtuon nagpakita nga ang kalig-on sa DELLA gi-regulate sa post-translation pinaagi sa duha ka mekanismo: polyubiquitination nga giaghat sa phytohormone gibberellin, nga mosangpot sa paspas nga pagkadaot niini, ug conjugation sa gagmay nga ubiquitin-like modifiers (SUMO) aron madugangan ang akumulasyon niini. Dugang pa, ang kalihokan sa DELLA dinamikong gi-regulate sa duha ka lainlaing glycosylation: ang interaksyon sa DELLA-TF gipalambo sa O-fucosylation apan gipugngan sa O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) modification. Bisan pa, ang papel sa DELLA phosphorylation nagpabilin nga dili klaro, tungod kay ang nangaging mga pagtuon nagpakita og nagkasumpaki nga mga resulta, gikan sa mga nagpakita nga ang phosphorylation nagpasiugda o nagpamenos sa pagkadaot sa DELLA ngadto sa uban nga nagpakita nga ang phosphorylation wala makaapekto sa kalig-on niini. Dinhi, among giila ang mga phosphorylation site sa REPRESSORga1-3(RGA, AtDELLA) giputli gikan sa Arabidopsis thaliana pinaagi sa mass spectrometry analysis ug nagpakita nga ang phosphorylation sa duha ka RGA peptides sa PolyS ug PolyS/T nga mga rehiyon nagpasiugda sa H2A binding ug gipauswag ang kalihokan sa RGA. Ang asosasyon sa RGA sa mga target promoter. Talalupangdon nga ang phosphorylation wala makaapekto sa mga interaksyon sa RGA-TF o kalig-on sa RGA. Ang among pagtuon nagpadayag sa mekanismo sa molekula diin ang phosphorylation nag-induce sa kalihokan sa DELLA.
Aron maklaro ang papel sa phosphorylation sa pag-regulate sa function sa DELLA, importante nga mailhan ang mga DELLA phosphorylation sites in vivo ug himuon ang mga functional analyses sa mga tanom. Pinaagi sa affinity purification sa mga plant extracts nga gisundan sa MS/MS analysis, among nailhan ang daghang phosphosites sa RGA. Ubos sa mga kondisyon sa kakulangan sa GA, ang RHA phosphorylation motaas, apan ang phosphorylation wala makaapekto sa kalig-on niini. Importante, ang co-IP ug ChIP-qPCR assays nagpadayag nga ang phosphorylation sa PolyS/T region sa RGA nagpasiugda sa interaksyon niini sa H2A ug sa asosasyon niini sa mga target promoters, nga nagpadayag sa mekanismo diin ang phosphorylation nag-induce sa function sa RGA.
Ang RGA girekrut aron target chromatin pinaagi sa interaksyon sa LHR1 subdomain sa TF ug dayon mogapos sa H2A pinaagi sa PolyS/T region ug PFYRE subdomain niini, nga nagporma sa H2A-RGA-TF complex aron mapalig-on ang RGA. Ang phosphorylation sa Pep 2 sa PolyS/T region tali sa DELLA domain ug sa GRAS domain pinaagi sa usa ka wala mailhing kinase nagpalambo sa RGA-H2A binding. Ang rgam2A mutant protein nagwagtang sa RGA phosphorylation ug nagsagop sa lahi nga protein conformation aron makabalda sa H2A binding. Kini moresulta sa destabilization sa transient TF-rgam2A interactions ug dissociation sa rgam2A gikan sa target chromatin. Kini nga hulagway nagpakita lamang sa RGA-mediated transcriptional repression. Usa ka susamang sumbanan ang mahimong ihulagway alang sa RGA-mediated transcriptional activation, gawas nga ang H2A-RGA-TF complex magpasiugda sa target gene transcription ug ang dephosphorylation sa rgam2A mokunhod sa transcription. Ang hulagway giusab gikan ni Huang et al.21.
Ang tanang kwantitatibong datos gi-analisar gamit ang Excel, ug ang mga mahinungdanong kalainan gitino gamit ang Student's t test. Walay gigamit nga mga pamaagi sa estadistika aron matino ang gidak-on sa sample. Walay datos nga wala iapil sa pag-analisar; ang eksperimento wala gihimo nga random; ang mga tigdukiduki wala magbantay sa distribusyon sa datos atol sa eksperimento ug sa ebalwasyon sa mga resulta. Ang gidak-on sa sample gipakita sa leyenda sa hulagway ug sa source data file.
Alang sa dugang nga impormasyon bahin sa disenyo sa pagtuon, tan-awa ang Natural Portfolio Report Abstract nga nalangkit niini nga artikulo.
Ang datos sa mass spectrometry proteomics gi-amot sa ProteomeXchange consortium pinaagi sa PRIDE66 partner repository nga adunay dataset identifier nga PXD046004. Ang tanan nga uban pang datos nga nakuha atol niini nga pagtuon gipresentar sa Supplementary Information, Supplementary Data Files, ug Raw Data Files. Ang tinubdan nga datos gihatag alang niini nga artikulo.
Oras sa pag-post: Nob-08-2024