Kini nga pagtuon nagpakita nga ang rhizosphere symbiotic fungus nga *Kosakonia oryziphila* NP19 nga gi-isolate gikan sa mga gamot sa humay usa ka maayong biopesticide nga makapalambo sa pagtubo sa tanom ug biopesticide para sa pagkontrol sa blast sa humay nga gipahinabo sa *Pyricularia oryzae*. Ang mga in vitro nga eksperimento gihimo sa presko nga mga dahon sa mga semilya sa jasmine rice sa Khao Dawk Mali 105 (KDML105) nga klase. Ang mga resulta nagpakita nga ang NP19 epektibong nakapugong sa pagtubo sa *Pyricularia oryzae* conidia. Ang impeksyon sa *Pyricularia oryzae* napugngan ubos sa tulo ka lain-laing mga kondisyon sa pagtambal: una, ang humay gi-kolonisa sa NP19 ug gi-inoculate sa *Pyricularia oryzae* conidia; ikaduha, usa ka sagol nga NP19 ug *Pyricularia oryzae* conidia ang gibutang sa mga dahon;
Ang bakterya sa rhizosphere nga *Kosakonia oryziphila* NP1914gi-isolate gikan sa mga gamot sa humay (*Oryza sativa* L. cv. RD6). Ang *Kosakonia oryziphila* NP19 adunay mga kabtangan nga makapadasig sa pagtubo sa tanom, lakip ang nitrogen fixation, produksiyon sa indoleacetic acid (IAA), ug solubilisasyon sa phosphate. Makapainteres, ang *Kosakonia oryziphila* NP19 nagpatunghag chitinase.14.Ang paggamit sa *Kosakonia oryziphila* NP19 sa mga liso sa humay sa KDML105 nakapaayo sa pagkabuhi sa humay human sa impeksyon sa rice blast. Ang tumong niini nga pagtuon mao ang (i) pagpatin-aw sa mekanismo sa pagpugong sa *Kosakonia oryziphila* NP19 batok sa rice blast ug (ii) pag-imbestiga sa epekto sa *Kosakonia oryziphila* NP19 sa pagkontrol sa rice blast.
Ang mga sustansya adunay hinungdanong papel sa pagtubo ug paglambo sa tanom, nga nagsilbing mga hinungdan nga nagkontrol sa lainlaing mga sakit nga mikrobyo. Ang nutrisyon sa mineral sa usa ka tanom ang nagtino sa resistensya niini sa sakit, mga kinaiya sa morpolohiya o tisyu, ug virulence, o ang abilidad nga mabuhi batok sa mga pathogen. Ang phosphorus makapahinay sa paglambo ug makapakunhod sa kagrabe sa pagbuto sa humay pinaagi sa pagdugang sa synthesis sa mga phenolic compound. Ang potassium sa kinatibuk-an makapakunhod sa insidente sa daghang mga sakit sa humay, sama sa pagbuto sa humay, bacterial leaf spot, leaf sheath spot, stem rot, ug leaf spot. Usa ka pagtuon ni Perrenoud nagpakita nga ang mga abono nga taas og potassium makapakunhod usab sa insidente sa mga sakit nga fungal sa humay ug makadugang sa ani. Daghang mga pagtuon ang nagpakita nga ang mga abono nga sulfur makapauswag sa resistensya sa tanom sa mga fungal pathogen.27Ang sobra nga magnesium (usa ka sangkap sa chlorophyll) mahimong mosangpot sa pagbuswak sa humay.21Ang zinc direktang makapatay sa mga pathogen, sa ingon makunhuran ang kagrabe sa sakit.22Ang mga pagsulay sa uma nagpakita nga bisan kung ang konsentrasyon sa phosphorus, potassium, sulfur, ug zinc sa yuta sa uma mas taas kaysa sa eksperimento sa kolon, ang rice blast mikaylap gihapon sa mga dahon sa humay. Ang mga sustansya sa yuta mahimong dili kaayo epektibo sa pagkontrol sa rice blast, tungod kay ang relatibong humidity ug temperatura dili paborable alang sa kusog nga pagdaghan sa pathogen.
Sa mga pagsulay sa uma, ang Stenotrophomonas maltophilia, P. dispersa, Xanthomonas sacchari, Burkholderia multivorans, Burkholderia diffusa, Burkholderia vietnamiensis ug C. gleum nakit-an sa tanang pagtambal. Ang Stenotrophomonas maltophilia na-isolate gikan sa rhizosphere sa trigo, oats, pepino, mais, ug patatas ug nagpakita og biocontrol.kalihokanbatok sa Colletotrichum nymphaeae.28 Dugang pa, ang P. dispersa gitaho nga epektibo batok sa itom ngapagkadunot sakamote.29 Dugang pa, ang R1 strain sa Xanthomonas sacchari nagpakita og antagonistic nga kalihokan batok sa rice blast ug panicle rot nga gipahinabo sa Burkholderiaglumae.30Ang Burkholderia oryzae NP19 makahimo og symbiotic nga relasyon sa tisyu sa humay atol sa pagtubo ug mahimong usa ka endemic symbiotic fungus alang sa pipila ka mga klase sa humay. Samtang ang ubang bakterya sa yuta mahimong mokolonisa sa humay human sa pag-transplant, ang blast fungus nga NP19, kung makolonisa na, makaimpluwensya sa daghang mga hinungdan sa mekanismo sa depensa sa humay batok niini nga sakit. Ang NP19 dili lamang makapugong sa pagtubo sa P. oryzae og sobra sa 50% (tan-awa ang Supplementary Table S1 sa online appendix), apan makapakunhod usab sa gidaghanon sa mga blast lesion sa mga dahon ug makadugang sa ani sa humay nga gi-inoculate o gi-kolonisa sa NP19 (RBf, RFf-B, ug RBFf-B) sa mga field trial (Figure S3).
Ang fungus nga Pyricularia oryzae, nga hinungdan sa pagbuto sa tanom, usa ka hemittrophic fungus nga nanginahanglan og mga sustansya gikan sa tanom nga host atol sa impeksyon. Ang mga tanom nagpatunghag reactive oxygen species (ROS) aron mapugngan ang impeksyon sa fungal; bisan pa, ang Pyricularia oryzae naggamit ug lain-laing mga estratehiya aron masumpo ang ROS nga gihimo sa host.31Ang mga peroxidase daw adunay papel sa pagsukol sa mga pathogen, lakip ang cross-linking sa mga protina sa cell wall, pagpalapot sa mga xylem wall, produksiyon sa ROS, ug pag-neutralize sa hydrogen peroxide.32Ang mga antioxidant enzyme mahimong magsilbing usa ka piho nga sistema sa pagtangtang sa ROS. Pinaagi sa ilang mga antioxidant nga kabtangan, ang superoxide dismutase (SOD) ug peroxidase (POD) makatabang sa pagsugod sa mga tubag sa depensa, diin ang SOD magsilbing unang linya sa depensa.33Sa humay, ang kalihokan sa peroxidase sa tanom maaghat human sa impeksyon sa mga pathogen sa tanom sama sa *Pyricularia oryzae* ug *Xanthomonas oryzae pv. Oryzae*.32Niini nga pagtuon, ang kalihokan sa peroxidase misaka sa humay nga gi-kolonisa ug/o gi-inoculate sa *Magnaporthe oryzae* NP19; bisan pa, ang *Magnaporthe oryzae* wala makaapekto sa kalihokan sa peroxidase. Ang Superoxide dismutase (SOD), isip H₂O₂ synthase, nag-catalyze sa pagkunhod sa O₂⁻ ngadto sa H₂O₂. Ang SOD adunay hinungdanon nga papel sa resistensya sa tanom sa lainlaing mga stress pinaagi sa pagbalanse sa konsentrasyon sa H₂O₂ sulod sa tanom, sa ingon nagpalambo sa resistensya sa tanom sa lainlaing mga stress³⁴. Niini nga pagtuon, sa eksperimento sa kolon, 30 ka adlaw pagkahuman sa inoculation sa *Magnaporthe oryzae* (30 DAT), ang mga kalihokan sa SOD sa mga grupo sa RF ug RBF mas taas og 121.9% ug 104.5% kaysa sa mga naa sa R nga grupo, matag usa, nga nagpakita sa tubag sa SOD sa impeksyon sa *Magnaporthe oryzae*. Sa mga eksperimento sa kolon ug sa uma, ang mga kalihokan sa SOD sa bugas nga gi-inoculate sa *Magnaporthe oryzae* NP19 kay 67.7% ug 28.8% nga mas taas kay sa wala gi-inoculate nga bugas 30 ka adlaw human sa inoculation, matag usa. Ang mga biochemical response sa tanom apektado sa palibot, tinubdan sa stress, ug tipo sa tanom³⁵. Ang mga kalihokan sa antioxidant enzyme sa tanom direktang apektado sa mga hinungdan sa palibot, nga sa baylo makaapekto sa mga kalihokan sa antioxidant enzyme sa tanom pinaagi sa pag-usab sa microbial community sa tanom.
Ang fungus nga dala sa sakit nga rice blast (Kosakonia oryziphila NP19, NCBI accession number PP861312) nga gigamit niini nga pagtuon kay strain13gi-isolate gikan sa mga gamot sa rice cultivar nga RD6 sa Nakhon Phanom Province, Thailand (16° 59′ 42.9″ N 104° 22′ 17.9″ E). Kini nga strain gipatubo sa nutrient broth (NB) sa 30°C ug 150 rpm sulod sa 18 ka oras. Aron makalkulo ang bacterial concentration, gisukod ang absorbance sa bacterial suspension sa 600 nm. Ang konsentrasyon sa bacterial suspension gi-adjust ngadto sa10⁶CFU/mL nga adunay sterile deionized nga tubig (dH₂OAng rice blast fungus (Pyricularia oryzae) gi-inokulate sa potato dextrose agar (PDA) ug gi-incubate sa 25°C sulod sa 7 ka adlaw. Ang fungal mycelium gibalhin sa rice bran agar medium (2% (w/v) rice bran, 0.5% (w/v) sucrose, ug 2% (w/v) agar nga gitunaw sa deionized nga tubig, pH 7) ug gi-incubate sa 25°C sulod sa 7 ka adlaw. Usa ka isterilisadong dahon sa usa ka susceptible rice cultivar (KDML105) ang gibutang sa mycelium aron ma-induce ang conidia ug gi-incubate sa 25°C sulod sa 5 ka adlaw ubos sa kombinasyon nga UV ug white light. Ang mga conidia gikolekta pinaagi sa hinay nga pagpahid sa mycelium ug sa nataptan nga nawong sa dahon gamit ang 10 ml nga isterilisadong 0.025% (v/v) Tween 20 solution. Ang fungal solution gisala pinaagi sa walo ka lut-od sa cheesecloth aron makuha ang mycelium, agar, ug mga dahon sa humay. Ang konsentrasyon sa conidia sa suspensyon gi-adjust ngadto sa 5 × 10⁵ conidia/ml para sa dugang nga pag-analisar.
Ang preskong mga kultura sa mga selula sa Kosakonia oryziphila NP19 giandam pinaagi sa pag-kultura sa NB medium sa 37 °C sulod sa 24 oras. Human sa centrifugation (3047 × g, 10 min), ang cell pellet gikolekta, gihugasan kaduha gamit ang 10 mM phosphate-buffered saline (PBS, pH 7.2), ug gi-resuspend sa samang buffer. Ang optical density sa cell suspension gisukod sa 600 nm, nga nakakuha og gibana-bana nga 1.0 (katumbas sa 1.0 × 10⁷ CFU/μl nga gitino pinaagi sa plating sa nutrient agar plates). Ang mga conidia sa P. oryzae nakuha pinaagi sa pagsuspinde niini sa PBS solution ug pag-ihap niini gamit ang hemocytometer. Ang mga suspensyon sa *K. oryziphila* NP19 ug *P. Para sa mga eksperimento sa leaf smear, ang mga conidia sa K. oryziphila* giandam sa preskong mga dahon sa humay sa konsentrasyon nga 1.0 × 10⁷ CFU/μL ug 5.0 × 10² conidia/μL, matag usa. Ang pamaagi sa pag-andam sa sample sa humay mao ang mosunod: 5 cm ang gitas-on nga mga dahon gikan sa mga semilya sa humay giputol ug gibutang sa mga Petri dish nga gilinyahan og basa nga absorbent paper. Lima ka grupo sa pagtambal ang gitukod: (i) R: mga dahon sa humay nga walay bacterial inoculation isip kontrol, nga gidugangan og 0.025% (v/v) Tween 20 solution; (ii) RB + F: humay nga gi-inoculate og K. oryziphila NP19, nga gidugangan og 2 μL nga conidia suspension sa fungus nga hinungdan sa rice blast; (iii) R + BF: Ang humay sa grupo R gidugangan og 4 μl nga sagol nga blast fungal conidia suspension ug K. oryziphila NP19 (volume ratio 1:1); (iv) R + F: Ang bugas sa grupo R nga gidugangan og 2 μl nga blast fungal conidia suspension; (v) RF + B: Ang bugas sa grupo R nga gidugangan og 2 μl nga blast fungal conidia suspension gi-incubate sulod sa 30 ka oras, ug dayon 2 μl nga K. oryziphila NP19 ang gidugang sa samang lugar. Ang tanang Petri dish gi-incubate sa 25°C sa kangitngit sulod sa 30 ka oras ug dayon gibutang ubos sa padayon nga kahayag. Ang matag grupo giporma sa tulo ka beses. Human sa 72 ka oras nga pag-culture, ang mga tisyu sa tanom giobserbahan ug gi-analisa pinaagi sa scanning electron microscopy (SEM). Sa laktod nga pagkasulti, ang mga tisyu sa tanom gi-fix sa phosphate buffer nga adunay 2.5% (v/v) glutaraldehyde ug gi-dehydrate pinaagi sa sunod-sunod nga ethanol solutions. Human sa critical-point drying gamit ang carbon dioxide, ang mga sample gi-sputter-coat og bulawan ug sa katapusan gisusi gamit ang scanning electron microscope.15
Oras sa pag-post: Disyembre 15, 2025