Kini nga pagtuon nagsusi sa lethality, sublethality, ug toxicity sa komersyal nga mga produkto.sipermethrinmga pormulasyon sa mga tadpoles sa anuran. Sa acute test, ang mga konsentrasyon nga 100–800 μg/L gisulayan sulod sa 96 ka oras. Sa chronic test, ang natural nga nahitabo nga mga konsentrasyon sa cypermethrin (1, 3, 6, ug 20 μg/L) gisulayan alang sa mortalidad, gisundan sa micronucleus testing ug mga abnormalidad sa nukleyar sa pula nga selula sa dugo sulod sa 7 ka adlaw. Ang LC50 sa komersyal nga pormulasyon sa cypermethrin sa mga tadpoles kay 273.41 μg L−1. Sa chronic test, ang pinakataas nga konsentrasyon (20 μg L−1) miresulta sa labaw sa 50% nga mortalidad, tungod kay kini nakapatay sa katunga sa mga tadpoles nga gisulayan. Ang micronucleus test nagpakita og mga mahinungdanong resulta sa 6 ug 20 μg L−1 ug daghang mga abnormalidad sa nukleyar ang nakita, nga nagpakita nga ang komersyal nga pormulasyon sa cypermethrin adunay genotoxic nga potensyal batok sa P. gracilis. Ang Cypermethrin usa ka taas nga risgo alang niini nga espisye, nga nagpakita nga kini mahimong hinungdan sa daghang mga problema ug makaapekto sa dinamika niini nga ekosistema sa mubo ug taas nga panahon. Busa, mahimong ikahinapos nga ang mga komersyal nga pormulasyon sa cypermethrin adunay makahilong epekto sa P. gracilis.
Tungod sa padayon nga pag-uswag sa mga kalihokan sa agrikultura ug sa intensive nga paggamit sapagkontrol sa pestemga lakang, ang mga hayop sa tubig kanunay nga naladlad sa mga pestisidyo1,2. Ang polusyon sa mga kahinguhaan sa tubig duol sa mga umahan makaapekto sa paglambo ug pagkabuhi sa mga organismo nga dili target sama sa mga amphibian.
Ang mga amphibian nahimong mas importante sa pagtimbang-timbang sa mga environmental matrices. Ang mga Anuran giisip nga maayong bioindicator sa mga pollutant sa palibot tungod sa ilang talagsaon nga mga kinaiya sama sa komplikado nga mga siklo sa kinabuhi, paspas nga pagtubo sa larva, trophic status, permeable nga panit10,11, pagsalig sa tubig alang sa pagpanganak12 ug walay proteksyon nga mga itlog11,13,14. Ang gamay nga baki sa tubig (Physalaemus gracilis), nga kasagarang nailhan nga weeping frog, gipakita nga usa ka bioindicator nga klase sa polusyon sa pestisidyo4,5,6,7,15. Ang klase makita sa mga nagbarog nga tubig, mga protektadong lugar o mga lugar nga adunay lain-laing puy-anan sa Argentina, Uruguay, Paraguay ug Brazil1617 ug giisip nga lig-on sa IUCN classification tungod sa lapad nga distribusyon ug pagkamatugtanon sa lain-laing mga puy-anan18.
Adunay mga gitaho nga sublethal nga epekto sa mga amphibian human sa pagkaladlad sa cypermethrin, lakip ang mga pagbag-o sa pamatasan, morpolohiya ug biokemikal sa mga butete23,24,25, pagbag-o sa mortalidad ug oras sa metamorphosis, mga pagbag-o sa enzymatic, pagkunhod sa kalampusan sa pagpusa24,25, hyperactivity26, pagpugong sa kalihokan sa cholinesterase27 ug mga pagbag-o sa performance sa paglangoy7,28. Bisan pa, limitado ang mga pagtuon sa genotoxic nga epekto sa cypermethrin sa mga amphibian. Busa, importante nga susihon ang pagkasensitibo sa mga espisye sa anuran sa cypermethrin.
Ang polusyon sa kalikopan makaapekto sa normal nga pagtubo ug paglambo sa mga amphibian, apan ang labing seryoso nga dili maayong epekto mao ang kadaot sa henetiko sa DNA nga gipahinabo sa pagkaladlad sa pestisidyo13. Ang pag-analisar sa morpolohiya sa selula sa dugo usa ka importante nga bioindicator sa polusyon ug potensyal nga pagkahilo sa usa ka substansiya sa ihalas nga mga espisye29. Ang pagsulay sa micronucleus usa sa labing kasagarang gigamit nga mga pamaagi alang sa pagtino sa genotoxicity sa mga kemikal sa kalikopan30. Kini usa ka paspas, epektibo ug barato nga pamaagi nga usa ka maayong timailhan sa polusyon sa kemikal sa mga organismo sama sa mga amphibian31,32 ug makahatag og impormasyon sa pagkaladlad sa mga genotoxic pollutant33.
Ang tumong niini nga pagtuon mao ang pagtimbang-timbang sa makahilong potensyal sa komersyal nga mga pormulasyon sa cypermethrin ngadto sa gagmay nga mga butete sa tubig gamit ang micronucleus test ug ecological risk assessment.
Kinatibuk-ang mortalidad (%) sa mga butete sa P. gracilis nga naladlad sa lain-laing konsentrasyon sa komersyal nga cypermethrin atol sa acute period sa pagsulay.
Kinatibuk-ang mortalidad (%) sa mga butete sa P. gracilis nga naladlad sa lain-laing konsentrasyon sa komersyal nga cypermethrin atol sa usa ka chronic test.
Ang naobserbahan nga taas nga mortalidad resulta sa genotoxic nga mga epekto sa mga amphibian nga naladlad sa lainlaing mga konsentrasyon sa cypermethrin (6 ug 20 μg/L), sama sa gipamatud-an sa presensya sa micronuclei (MN) ug mga abnormalidad sa nukleyar sa mga erythrocyte. Ang pagporma sa MN nagpakita sa mga sayup sa mitosis ug nalangkit sa dili maayo nga pagbugkos sa mga chromosome sa mga microtubules, mga depekto sa mga protein complex nga responsable sa pagsuhop ug pagdala sa chromosome, mga sayup sa paglainlain sa chromosome ug mga sayup sa pag-ayo sa kadaot sa DNA38,39 ug mahimong may kalabotan sa oxidative stress nga gipahinabo sa pestisidyo40,41. Ang ubang mga abnormalidad naobserbahan sa tanan nga mga konsentrasyon nga gisusi. Ang pagtaas sa konsentrasyon sa cypermethrin nagdugang sa mga abnormalidad sa nukleyar sa mga erythrocyte sa 5% ug 20% sa labing ubos (1 μg/L) ug labing taas (20 μg/L) nga dosis, matag usa. Pananglitan, ang mga pagbag-o sa DNA sa usa ka espisye mahimong adunay seryoso nga mga sangputanan alang sa mubo ug taas nga termino nga pagkabuhi, nga moresulta sa pagkunhod sa populasyon, pagbag-o sa kahimsog sa reproduktibo, inbreeding, pagkawala sa genetic diversity, ug pagbag-o sa mga rate sa paglalin. Kining tanan nga mga hinungdan makaapekto sa pagkabuhi ug pagmentinar sa mga espisye42,43. Ang pagkaporma sa mga abnormalidad sa erythroid mahimong magpakita sa usa ka pagbabag sa cytokinesis, nga moresulta sa abnormal nga pagbahin sa selula (binucleated erythrocytes)44,45; ang multilobed nuclei mga protrusion sa nuclear membrane nga adunay daghang lobes46, samtang ang ubang mga abnormalidad sa erythroid mahimong nalangkit sa pagpadako sa DNA, sama sa nuclear kidneys/blebs47. Ang presensya sa mga anucleated erythrocyte mahimong magpakita sa pagkadaot sa transportasyon sa oksiheno, labi na sa kontaminado nga tubig48,49. Ang apoptosis nagpakita sa kamatayon sa selula50.
Gipakita usab sa ubang mga pagtuon ang genotoxic nga mga epekto sa cypermethrin. Gipakita ni Kabaña et al.51 ang presensya sa mga pagbag-o sa micronuclei ug nukleyar sama sa binucleated cells ug apoptotic cells sa mga selula sa Odontophrynus americanus human sa pagkaladlad sa taas nga konsentrasyon sa cypermethrin (5000 ug 10,000 μg L−1) sulod sa 96 ka oras. Ang apoptosis nga gipahinabo sa Cypermethrin nakita usab sa P. biligonigerus52 ug Rhinella arenarum53. Kini nga mga resulta nagsugyot nga ang cypermethrin adunay genotoxic nga mga epekto sa lainlaing mga organismo sa tubig ug nga ang MN ug ENA assay mahimong usa ka timailhan sa sublethal nga mga epekto sa mga amphibian ug mahimong magamit sa lumad nga mga espisye ug ihalas nga mga populasyon nga naladlad sa mga toxicant12.
Ang mga komersyal nga pormulasyon sa cypermethrin adunay taas nga peligro sa kalikopan (parehong mahait ug laygay), diin ang mga HQ molapas sa lebel sa US Environmental Protection Agency (EPA)54 nga mahimong makaapekto sa mga espisye kung naa sa kalikopan. Sa pagtimbang-timbang sa peligro sa laygay, ang NOEC alang sa mortalidad kay 3 μg L−1, nga nagpamatuod nga ang mga konsentrasyon nga makita sa tubig mahimong peligro sa mga espisye55. Ang makamatay nga NOEC alang sa larvae sa R. arenarum nga naladlad sa usa ka sinagol nga endosulfan ug cypermethrin kay 500 μg L−1 pagkahuman sa 168 ka oras; kini nga kantidad mikunhod ngadto sa 0.0005 μg L−1 pagkahuman sa 336 ka oras. Gipakita sa mga tagsulat nga kon mas dugay ang pagkaladlad, mas ubos ang mga konsentrasyon nga makadaot sa mga espisye. Importante usab nga ipasiugda nga ang mga kantidad sa NOEC mas taas kaysa sa P. gracilis sa parehas nga oras sa pagkaladlad, nga nagpakita nga ang tubag sa mga espisye sa cypermethrin espesipiko sa mga espisye. Dugang pa, sa mga termino sa mortalidad, ang CHQ value sa P. gracilis human sa pagkaladlad sa cypermethrin miabot sa 64.67, nga mas taas kay sa reference value nga gitakda sa US Environmental Protection Agency54, ug ang CHQ value sa R. arenarum larvae mas taas usab kay niini nga value (CHQ > 388.00 human sa 336 ka oras), nga nagpakita nga ang gitun-an nga mga insecticide adunay taas nga risgo sa daghang mga amphibian species. Tungod kay ang P. gracilis nagkinahanglan og gibana-bana nga 30 ka adlaw aron makompleto ang metamorphosis56, mahimong mahinulsulan nga ang gitun-an nga konsentrasyon sa cypermethrin mahimong makatampo sa pagkunhod sa populasyon pinaagi sa pagpugong sa mga nataptan nga indibidwal sa pagsulod sa hamtong o reproduktibong yugto sa sayo nga edad.
Sa gikalkulo nga pagtimbang-timbang sa risgo sa micronuclei ug uban pang mga abnormalidad sa nukleyar nga erythrocyte, ang mga kantidad sa CHQ gikan sa 14.92 hangtod 97.00, nga nagpakita nga ang cypermethrin adunay potensyal nga peligro sa genotoxic sa P. gracilis bisan sa natural nga puy-anan niini. Kung gikonsiderar ang mortalidad, ang labing taas nga konsentrasyon sa xenobiotic compound nga maagwanta sa P. gracilis kay 4.24 μg L−1. Bisan pa, ang mga konsentrasyon nga ubos sa 1 μg/L nagpakita usab og mga epekto sa genotoxic. Kini nga kamatuoran mahimong mosangpot sa pagtaas sa gidaghanon sa mga abnormal nga indibidwal57 ug makaapekto sa paglambo ug pagpanganak sa mga espisye sa ilang mga puy-anan, nga mosangpot sa pagkunhod sa populasyon sa amphibian.
Ang mga komersyal nga pormulasyon sa insecticide nga cypermethrin nagpakita og taas nga acute ug chronic toxicity sa P. gracilis. Mas taas nga mortality rates ang naobserbahan, lagmit tungod sa mga makahilong epekto, sama sa gipamatud-an sa presensya sa micronuclei ug erythrocyte nuclear abnormalities, ilabina ang serrated nuclei, lobed nuclei, ug vesicular nuclei. Dugang pa, ang gitun-an nga espisye nagpakita og dugang nga mga risgo sa kalikopan, acute ug chronic. Kini nga datos, inubanan sa mga nangaging pagtuon sa among research group, nagpakita nga bisan ang lain-laing komersyal nga pormulasyon sa cypermethrin hinungdan gihapon sa pagkunhod sa acetylcholinesterase (AChE) ug butyrylcholinesterase (BChE) nga mga kalihokan ug oxidative stress58, ug miresulta sa mga pagbag-o sa swimming activity ug oral malformations59 sa P. gracilis, nga nagpakita nga ang komersyal nga pormulasyon sa cypermethrin adunay taas nga lethal ug sublethal toxicity niini nga espisye. Nakita ni Hartmann et al. 60 nga ang komersyal nga pormulasyon sa cypermethrin mao ang labing makahilo sa P. gracilis ug laing espisye sa parehas nga genus (P. cuvieri) kon itandi sa siyam ka ubang mga pestisidyo. Kini nagsugyot nga ang legal nga giaprobahan nga konsentrasyon sa cypermethrin alang sa pagpanalipod sa kalikupan mahimong moresulta sa taas nga mortalidad ug dugay nga pagkunhod sa populasyon.
Kinahanglan ang dugang nga mga pagtuon aron masusi ang pagkahilo sa pestisidyo sa mga amphibian, tungod kay ang mga konsentrasyon nga makita sa palibot mahimong hinungdan sa taas nga mortalidad ug mahimong peligro sa P. gracilis. Ang panukiduki sa mga espisye sa amphibian kinahanglan nga dasigon, tungod kay ang datos bahin niini nga mga organismo kulang, labi na sa mga espisye sa Brazil.
Ang chronic toxicity test milungtad og 168 ka oras (7 ka adlaw) ubos sa static nga mga kondisyon ug ang sublethal nga konsentrasyon mao ang: 1, 3, 6 ug 20 μg ai L−1. Sa duha ka eksperimento, 10 ka tadpoles kada treatment group ang gisusi gamit ang unom ka replicates, para sa total nga 60 ka tadpoles kada konsentrasyon. Samtang, ang water-only treatment nagsilbing negative control. Ang matag experimental setup gilangkoban sa usa ka sterile glass dish nga adunay kapasidad nga 500 ml ug density nga 1 ka tadpole kada 50 ml nga solusyon. Ang flask gitabonan og polyethylene film aron malikayan ang pag-alisngaw ug padayon nga gipa-aerate.
Ang tubig gisusi sa kemikal aron mahibal-an ang konsentrasyon sa pestisidyo sa 0, 96, ug 168 ka oras. Sumala nila ni Sabin et al. 68 ug Martins et al. 69, ang mga pag-analisar gihimo sa Pesticide Analysis Laboratory (LARP) sa Federal University of Santa Maria gamit ang gas chromatography nga giubanan sa triple quadrupole mass spectrometry (Varian model 1200, Palo Alto, California, USA). Ang quantitative determination sa mga pestisidyo sa tubig gipakita isip supplementary material (Table SM1).
Para sa micronucleus test (MNT) ug red cell nuclear abnormality test (RNA), 15 ka tadpoles gikan sa matag treatment group ang gisusi. Ang mga tadpoles gi-anesthesia gamit ang 5% lidocaine (50 mg g-170) ug ang mga sample sa dugo gikolekta pinaagi sa cardiac puncture gamit ang disposable heparinized syringes. Ang mga blood smear giandam sa sterile microscope slides, gipauga sa hangin, gi-fix gamit ang 100% methanol (4 °C) sulod sa 2 ka minuto, ug dayon gi-stain gamit ang 10% Giemsa solution sulod sa 15 ka minuto sa ngitngit nga lugar. Sa katapusan sa proseso, ang mga slide gihugasan gamit ang distilled water aron makuha ang sobra nga mansa ug gipauga sa temperatura sa kwarto.
Labing menos 1000 ka RBC gikan sa matag tadpole ang gisusi gamit ang 100× microscope nga adunay 71 ka obhetibo aron mahibal-an ang presensya sa MN ug ENA. Usa ka total nga 75,796 ka RBC gikan sa mga tadpole ang gisusi gamit ang mga konsentrasyon ug kontrol sa cypermethrin. Ang genotoxicity gisusi sumala sa pamaagi ni Carrasco et al. ug Fenech et al.38,72 pinaagi sa pagtino sa frequency sa mosunod nga mga nuclear lesion: (1) anucleate cells: mga selula nga walay nuclei; (2) apoptotic cells: nuclear fragmentation, programmed cell death; (3) binucleate cells: mga selula nga adunay duha ka nuclei; (4) nuclear buds o bleb cells: mga selula nga adunay nuclei nga adunay gagmay nga mga protrusion sa nuclear membrane, mga bleb nga parehas ang gidak-on sa micronuclei; (5) karyolyzed cells: mga selula nga adunay outline lamang sa nucleus nga walay internal nga materyal; (6) notched cells: mga selula nga adunay nuclei nga adunay klaro nga mga liki o notches sa ilang porma, nga gitawag usab nga kidney-shaped nuclei; (7) mga lobulated cells: mga cells nga adunay nuclear protrusions nga mas dako kay sa nahisgutang mga vesicle; ug (8) mga microcells: mga cells nga adunay condensed nuclei ug mikunhod nga cytoplasm. Ang mga pagbag-o gitandi sa mga resulta sa negatibo nga kontrol.
Ang mga resulta sa acute toxicity test (LC50) gisusi gamit ang GBasic software ug ang TSK-Trimmed Spearman-Karber method74. Ang datos sa chronic test gi-pre-test para sa error normality (Shapiro-Wilks) ug homogeneity of variance (Bartlett). Ang mga resulta gisusi gamit ang one-way analysis of variance (ANOVA). Gigamit ang Tukey's test aron itandi ang datos sa ilang kaugalingon, ug ang Dunnett's test gigamit aron itandi ang datos tali sa treatment group ug sa negative control group.
Ang datos sa LOEC ug NOEC gisusi gamit ang Dunnett's test. Ang mga estadistikal nga pagsulay gihimo gamit ang Statistica 8.0 software (StatSoft) nga adunay lebel sa kamahinungdanon nga 95% (p < 0.05).
Oras sa pag-post: Mar-13-2025