Gisusi sa kini nga pagtuon ang lethality, sublethality, ug toxicity sa komersyalcypermethrinmga pormulasyon sa anuran tadpoles. Sa mahait nga pagsulay, ang mga konsentrasyon sa 100-800 μg / L gisulayan sulod sa 96 ka oras. Sa talamak nga pagsulay, ang natural nga nahitabo nga cypermethrin concentrations (1, 3, 6, ug 20 μg/L) gisulayan alang sa mortalidad, gisundan sa micronucleus testing ug red blood cell nuclear abnormalities sulod sa 7 ka adlaw. Ang LC50 sa commercial cypermethrin formulation ngadto sa tadpoles kay 273.41 μg L−1. Sa talamak nga pagsulay, ang labing taas nga konsentrasyon (20 μg L−1) miresulta sa labaw sa 50% nga pagkamatay, tungod kay gipatay niini ang katunga sa mga tadpoles nga gisulayan. Ang micronucleus test nagpakita sa mahinungdanong mga resulta sa 6 ug 20 μg L−1 ug daghang mga nukleyar nga abnormalidad ang nakita, nga nagpakita nga ang komersyal nga cypermethrin nga pormulasyon adunay genotoxic nga potensyal batok sa P. gracilis. Ang Cypermethrin usa ka taas nga risgo alang niini nga espisye, nga nagpakita nga kini mahimong hinungdan sa daghang mga problema ug makaapekto sa dinamika niini nga ekosistema sa mubo ug taas nga termino. Busa, mahimong makahinapos nga ang komersyal nga mga pormulasyon sa cypermethrin adunay makahilo nga epekto sa P. gracilis.
Tungod sa padayon nga pagpalapad sa mga kalihokan sa agrikultura ug intensive nga paggamit sapagpugong sa pestemga lakang, ang mga mananap sa tubig kanunay nga naladlad sa mga pestisidyo1,2. Ang polusyon sa mga kahinguhaan sa tubig duol sa mga umahan sa agrikultura mahimong makaapekto sa pag-uswag ug pagkaluwas sa dili target nga mga organismo sama sa mga amphibian.
Ang mga amphibian nahimong labi ka hinungdanon sa pagtimbang-timbang sa mga matrice sa kalikopan. Ang Anurans gikonsiderar nga maayo nga bioindicators sa mga pollutant sa kinaiyahan tungod sa ilang talagsaon nga mga kinaiya sama sa komplikadong mga siklo sa kinabuhi, paspas nga pagtubo sa ulod, trophic status, permeable skin10,11, pagsalig sa tubig alang sa reproduction12 ug unprotected nga mga itlog11,13,14. Ang gamay nga baki sa tubig (Physalaemus gracilis), kasagarang nailhan nga naghilak nga baki, gipakita nga usa ka bioindicator nga matang sa polusyon sa pestisidyo4,5,6,7,15. Ang mga espisye makit-an sa nagbarog nga tubig, protektadong mga lugar o mga lugar nga adunay variable nga pinuy-anan sa Argentina, Uruguay, Paraguay ug Brazil1617 ug gikonsiderar nga lig-on sa klasipikasyon sa IUCN tungod sa lapad nga pag-apod-apod ug pagtugot sa lainlaing mga puy-anan18.
Ang mga sublethal nga epekto gitaho sa mga amphibian human sa pagkaladlad sa cypermethrin, lakip na ang mga pagbag-o sa pamatasan, morphological ug biochemical sa tadpoles23,24,25, giusab nga mortalidad ug oras sa metamorphosis, mga pagbag-o sa enzymatic, pagkunhod sa kalampusan sa pagpusa24,25, hyperactivity26, pagdili sa kalihokan sa cholinesterase27, ug mga pagbag-o sa kalihokan sa paglangoy27,28. Bisan pa, ang mga pagtuon sa genotoxic nga epekto sa cypermethrin sa mga amphibian limitado. Busa, importante nga masusi ang pagkadaling makuha sa anuran species sa cypermethrin.
Ang polusyon sa kinaiyahan makaapekto sa normal nga pagtubo ug paglambo sa mga amphibian, apan ang labing grabe nga dili maayo nga epekto mao ang genetic nga kadaot sa DNA tungod sa pagkaladlad sa pestisidyo13. Ang pag-analisa sa morpolohiya sa selula sa dugo usa ka importante nga bioindicator sa polusyon ug potensyal nga pagkahilo sa usa ka substansiya ngadto sa ihalas nga mga espisye29. Ang micronucleus test maoy usa sa kasagarang gigamit nga pamaagi sa pagtino sa genotoxicity sa mga kemikal sa palibot30. Kini usa ka paspas, epektibo ug barato nga pamaagi nga usa ka maayong timailhan sa kemikal nga polusyon sa mga organismo sama sa mga amphibian31,32 ug makahatag ug impormasyon sa pagkaladlad sa genotoxic pollutants33.
Ang katuyoan niini nga pagtuon mao ang pagtimbang-timbang sa makahilo nga potensyal sa mga pormulasyon sa komersyal nga cypermethrin sa gagmay nga mga tadpoles sa tubig gamit ang usa ka pagsulay sa micronucleus ug pagsusi sa peligro sa ekolohiya.
Cumulative mortality (%) sa P. gracilis tadpoles naladlad sa lain-laing mga konsentrasyon sa commercial cypermethrin sa panahon sa mahait nga panahon sa pagsulay.
Cumulative mortality (%) sa P. gracilis tadpoles nga na-expose sa lain-laing konsentrasyon sa commercial cypermethrin atol sa chronic test.
Ang naobserbahan nga taas nga mortalidad resulta sa mga epekto sa genotoxic sa mga amphibian nga naladlad sa lainlaing mga konsentrasyon sa cypermethrin (6 ug 20 μg / L), ingon gipakita sa presensya sa micronuclei (MN) ug mga abnormalidad sa nukleyar sa erythrocytes. Ang pagporma sa MN nagpaila sa mga kasaypanan sa mitosis ug nalangkit sa dili maayo nga pagbugkos sa mga chromosome ngadto sa microtubule, mga depekto sa mga complex sa protina nga responsable sa chromosome uptake ug transport, mga sayop sa chromosome segregation ug mga sayop sa DNA damage repair38,39 ug mahimong may kalabutan sa pestisidyo-induced oxidative stress40,41. Ang ubang mga abnormalidad naobserbahan sa tanan nga mga konsentrasyon nga gisusi. Ang pagdugang sa mga konsentrasyon sa cypermethrin nagdugang sa mga abnormalidad sa nukleyar sa mga erythrocytes sa 5% ug 20% sa labing ubos (1 μg / L) ug labing taas (20 μg / L) nga mga dosis, matag usa. Pananglitan, ang mga pagbag-o sa DNA sa usa ka espisye mahimong adunay seryoso nga mga sangputanan alang sa mubo ug dugay nga pagkaluwas, nga moresulta sa pagkunhod sa populasyon, pagbag-o sa kahimsog sa pagsanay, pagpanganak, pagkawala sa pagkalainlain sa genetic, ug pagbag-o sa rate sa paglalin. Ang tanan niini nga mga hinungdan mahimong makaapekto sa pagkaluwas ug pagpadayon sa mga espisye42,43. Ang pagporma sa mga abnormalidad sa erythroid mahimong magpakita sa usa ka block sa cytokinesis, nga moresulta sa abnormal nga cell division (binucleated erythrocytes)44,45; Ang multilobed nuclei mga protrusions sa nuclear membrane nga adunay daghang lobes46, samtang ang uban nga mga abnormalidad sa erythroid mahimong nalangkit sa DNA amplification, sama sa nuclear kidneys/blebs47. Ang presensya sa anucleated erythrocytes mahimong magpakita sa pagkadaot sa transportasyon sa oxygen, labi na sa kontaminado nga tubig48,49. Ang apoptosis nagpaila sa pagkamatay sa selula50.
Gipakita usab sa ubang mga pagtuon ang genotoxic nga epekto sa cypermethrin. Ang Kabaña et al.51 nagpakita sa presensya sa micronuclei ug nukleyar nga mga kausaban sama sa binucleated cells ug apoptotic cells sa Odontophrynus americanus cells human sa exposure sa taas nga konsentrasyon sa cypermethrin (5000 ug 10,000 μg L−1) sulod sa 96 h. Ang Cypermethrin-induced apoptosis nakita usab sa P. biligonigerus52 ug Rhinella arenarum53. Kini nga mga resulta nagsugyot nga ang cypermethrin adunay genotoxic nga mga epekto sa lain-laing mga aquatic organisms ug nga ang MN ug ENA assay mahimong usa ka timailhan sa sublethal nga mga epekto sa amphibians ug mahimong magamit sa lumad nga mga espisye ug ihalas nga mga populasyon nga naladlad sa mga makahilo12.
Ang mga komersyal nga pormulasyon sa cypermethrin naghatag ug taas nga peligro sa kinaiyahan (parehong acute ug chronic), nga ang mga HQ milapas sa US Environmental Protection Agency (EPA) nga lebel54 nga mahimong makaapektar sa mga espisye kon anaa sa palibot. Sa chronic risk assessment, ang NOEC alang sa mortalidad kay 3 μg L−1, nga nagpamatuod nga ang mga konsentrasyon nga makita sa tubig mahimong magbutang ug risgo sa species55. Ang makamatay nga NOEC alang sa R. arenarum larvae nga naladlad sa sinagol nga endosulfan ug cypermethrin mao ang 500 μg L−1 human sa 168 ka oras; kini nga kantidad mikunhod ngadto sa 0.0005 μg L−1 human sa 336 ka oras. Gipakita sa mga tagsulat nga kung mas taas ang pagkaladlad, mas mubu ang mga konsentrasyon nga makadaot sa mga espisye. Mahinungdanon usab nga ipasiugda nga ang mga kantidad sa NOEC mas taas kaysa sa P. gracilis sa parehas nga oras sa pagkaladlad, nga nagpakita nga ang tubag sa mga espisye sa cypermethrin espesipiko sa espisye. Dugang pa, sa termino sa pagka-mortal, ang CHQ nga kantidad sa P. gracilis human sa pagkaladlad sa cypermethrin miabot sa 64.67, nga mas taas kay sa reference value nga gitakda sa US Environmental Protection Agency54, ug ang CHQ nga kantidad sa R. arenarum larvae mas taas usab niini nga bili (CHQ > 388.00 human sa 336 ka oras nga high risk), nga nagpakita nga adunay taas nga risgo nga gitun-an. espisye. Sa pagkonsiderar nga ang P. gracilis nanginahanglan ug gibana-bana nga 30 ka adlaw aron makompleto ang metamorphosis56, mahimo’g mahinapos nga ang gitun-an nga konsentrasyon sa cypermethrin mahimong makatampo sa pagkunhod sa populasyon pinaagi sa pagpugong sa mga nataptan nga indibidwal sa pagsulod sa hamtong o reproductive stage sa sayo nga edad.
Sa kalkulado nga risk assessment sa micronuclei ug uban pang erythrocyte nuclear abnormalities, ang CHQ values nagsangkad gikan sa 14.92 ngadto sa 97.00, nga nagpakita nga ang cypermethrin adunay potensyal nga genotoxic nga risgo sa P. gracilis bisan sa natural nga pinuy-anan niini. Sa pagkonsiderar sa mortalidad, ang pinakataas nga konsentrasyon sa xenobiotic compounds nga maagwanta sa P. gracilis mao ang 4.24 μg L−1. Bisan pa, ang mga konsentrasyon nga ubos sa 1 μg / L nagpakita usab nga mga epekto sa genotoxic. Kini nga kamatuoran mahimong mosangpot sa pagsaka sa gidaghanon sa abnormal nga mga indibidwal57 ug makaapekto sa paglambo ug pagpadaghan sa mga espisye sa ilang mga pinuy-anan, nga mosangpot sa pagkunhod sa populasyon sa amphibian.
Ang mga komersyal nga pormulasyon sa insecticide cypermethrin nagpakita sa taas nga acute ug chronic toxicity sa P. gracilis. Ang mas taas nga rate sa pagkamatay naobserbahan, lagmit tungod sa makahilo nga mga epekto, ingon nga ebidensya sa presensya sa micronuclei ug erythrocyte nukleyar nga mga abnormalidad, labi na ang serrated nuclei, lobed nuclei, ug vesicular nuclei. Dugang pa, ang gitun-an nga mga espisye nagpakita sa dugang nga peligro sa kalikopan, pareho nga mahait ug talamak. Kini nga mga datos, inubanan sa nangaging mga pagtuon sa among grupo sa panukiduki, nagpakita nga bisan ang lainlaing komersyal nga pormulasyon sa cypermethrin nagpahinabo gihapon sa pagkunhod sa acetylcholinesterase (AChE) ug butyrylcholinesterase (BChE) nga mga kalihokan ug oxidative stress58, ug miresulta sa mga pagbag-o sa kalihokan sa paglangoy ug oral malformations59 sa P. gracilis, nga nagpaila nga ang komersyal nga mga pormulasyon sa kini nga subtoxic sa cyhallet adunay taas nga pormulasyon sa cyperth. Hartmann ug uban pa. 60 nakit-an nga ang mga komersyal nga pormulasyon sa cypermethrin mao ang labing makahilo sa P. gracilis ug sa lain nga espisye sa parehas nga genus (P. cuvieri) kumpara sa siyam ka ubang mga pestisidyo. Kini nagsugyot nga ang legal nga giaprobahan nga mga konsentrasyon sa cypermethrin alang sa pagpanalipod sa kinaiyahan mahimong moresulta sa taas nga mortalidad ug dugay nga pagkunhod sa populasyon.
Ang dugang nga mga pagtuon gikinahanglan aron masusi ang pagkahilo sa pestisidyo ngadto sa mga amphibian, tungod kay ang mga konsentrasyon nga makit-an sa palibot mahimong hinungdan sa taas nga mortalidad ug mahimong peligro sa P. gracilis. Ang panukiduki bahin sa mga espisye sa amphibian kinahanglan nga dasigon, tungod kay nihit ang datos sa kini nga mga organismo, labi na sa mga espisye sa Brazil.
Ang chronic toxicity test milungtad sa 168 h (7 ka adlaw) ubos sa static nga kondisyon ug ang sublethal nga konsentrasyon mao ang: 1, 3, 6 ug 20 μg ai L−1. Sa duha ka eksperimento, 10 ka tadpoles kada treatment group ang gi-evaluate nga adunay unom ka replika, sa kinatibuk-an nga 60 tadpoles kada konsentrasyon. Samtang, ang water-only treatment nagsilbi nga negatibo nga kontrol. Ang matag eksperimento nga pag-setup naglangkob sa usa ka sterile nga baso nga pinggan nga adunay kapasidad nga 500 ml ug usa ka densidad nga 1 tadpole matag 50 ml nga solusyon. Ang flask gitabonan sa polyethylene film aron malikayan ang pag-alisngaw ug padayon nga gi-aerated.
Ang tubig gi-analisa sa kemikal aron mahibal-an ang mga konsentrasyon sa pestisidyo sa 0, 96, ug 168 ka oras. Sumala sa Sabin et al. 68 ug Martins et al. 69, ang mga pag-analisar gihimo sa Pesticide Analysis Laboratory (LARP) sa Federal University of Santa Maria gamit ang gas chromatography inubanan sa triple quadrupole mass spectrometry (Varian model 1200, Palo Alto, California, USA). Ang quantitative determination sa pestisidyo sa tubig gipakita isip supplementary material (Table SM1).
Alang sa micronucleus test (MNT) ug red cell nuclear abnormality test (RNA), 15 ka tadpoles gikan sa matag grupo sa pagtambal ang gisusi. Ang mga tadpoles gi-anesthetize sa 5% lidocaine (50 mg g-170) ug ang mga sample sa dugo gikolekta pinaagi sa cardiac puncture gamit ang disposable heparinized syringes. Ang mga smear sa dugo giandam sa sterile microscope slides, gipauga sa hangin, gitakda sa 100% methanol (4 °C) sulod sa 2 min, ug dayon gimantsa sa 10% Giemsa nga solusyon sulod sa 15 min sa kangitngit. Sa katapusan sa proseso, ang mga slide gihugasan sa distilled water aron makuha ang sobra nga mantsa ug mamala sa temperatura sa kwarto.
Labing menos 1000 ka RBC gikan sa matag tadpole ang gisusi gamit ang 100× mikroskopyo nga adunay 71 ka tumong aron matino ang presensya sa MN ug ENA. Usa ka kinatibuk-an nga 75,796 nga RBC gikan sa tadpoles ang gisusi nga gikonsiderar ang mga konsentrasyon ug kontrol sa cypermethrin. Gisusi ang genotoxicity sumala sa pamaagi sa Carrasco et al. ug Fenech et al.38,72 pinaagi sa pagtino sa frequency sa mosunod nga nukleyar nga mga samad: (1) anucleate cells: mga selula nga walay nuclei; (2) apoptikong mga selula: nukleyar nga pagkabahinbahin, giprograma nga kamatayon sa selula; (3) binucleate nga mga selula: mga selula nga adunay duha ka nuclei; (4) nuclear buds o bleb cells: mga selula nga adunay nuclei nga adunay gagmay nga mga protrusions sa nuclear membrane, mga bleb nga susama sa gidak-on sa micronuclei; (5) karyolyzed nga mga selula: mga selula nga adunay outline lamang sa nucleus nga walay sulod nga materyal; (6) mga notched nga mga selula: mga selula nga adunay nuclei nga adunay klaro nga mga liki o mga notch sa ilang porma, nga gitawag usab nga kidney-shaped nuclei; (7) lobulated nga mga selula: mga selula nga adunay nukleyar nga mga protrusions nga mas dako pa kay sa nahisgutang mga vesicle; ug (8) microcells: mga selula nga adunay condensed nuclei ug pagkunhod sa cytoplasm. Ang mga pagbag-o gitandi sa negatibo nga mga resulta sa pagkontrol.
Ang mga resulta sa acute toxicity test (LC50) gisusi gamit ang GBasic software ug TSK-Trimmed Spearman-Karber method74. Ang chronic test data kay pre-tested para sa error normality (Shapiro-Wilks) ug homogeneity of variance (Bartlett). Ang mga resulta gisusi gamit ang one-way analysis of variance (ANOVA). Ang pagsulay ni Tukey gigamit aron itandi ang datos sa ilang kaugalingon, ug ang pagsulay ni Dunnett gigamit aron itandi ang datos tali sa grupo sa pagtambal ug sa negatibo nga grupo sa pagkontrol.
Ang datos sa LOEC ug NOEC gisusi gamit ang pagsulay ni Dunnett. Ang mga pagsulay sa estadistika gihimo gamit ang Statistica 8.0 software (StatSoft) nga adunay lebel sa kahulogan nga 95% (p <0.05).
Oras sa pag-post: Mar-13-2025