Ang pine nematode usa ka quarantine migratory endoparasite nga nahibal-an nga hinungdan sa grabe nga pagkawala sa ekonomiya sa ekosistema sa lasang sa pino. Ang kasamtangan nga pagtuon nagrepaso sa nematicidal activity sa halogenated indoles batok sa pine nematodes ug sa ilang mekanismo sa aksyon. Ang nematicidal nga mga kalihokan sa 5-iodoindole ug avermectin (positibo nga pagkontrol) batok sa pine nematodes parehas ug taas sa ubos nga konsentrasyon (10 μg/mL). 5-iodoindole mikunhod fecundity, reproductive kalihokan, embryonic ug ulod mortalidad, ug locomotor kinaiya. Ang mga interaksyon sa molekula sa mga ligand nga adunay invertebrate-specific glutamate-gated chloride channel receptors nagsuporta sa ideya nga ang 5-iodoindole, sama sa avermectin, hugot nga nagbugkos sa receptor active site. Ang 5-Iodoindole usab nag-aghat sa nagkalain-laing phenotypic deformation sa mga nematodes, lakip na ang abnormal nga pagkahugno/pag-us-os sa organ ug nagkadaghang vacuolization. Kini nga mga resulta nagsugyot nga ang mga vacuoles mahimong adunay papel sa nematode methylation-mediated nga kamatayon. Importante, ang 5-iodoindole dili makahilo sa duha ka espisye sa tanom (repolyo ug radish). Busa, kini nga pagtuon nagpakita nga ang paggamit sa iodoindole ubos sa mga kondisyon sa kalikopan makakontrol sa kadaot sa pine wilt.
Ang pine wood nematode (Bursaphelenchus xylophilus) iya sa pine wood nematodes (PWN), migratory endoparasitic nematodes nga nahibal-an nga hinungdan sa grabe nga kadaot sa ekolohiya sa mga ekosistema sa pine forest1. Ang Pine wilt disease (PWD) tungod sa pine wood nematode nahimong usa ka seryoso nga problema sa daghang mga kontinente, lakip ang Asia ug Europe, ug sa North America, ang nematode makaguba sa gipaila nga mga pine species1,2. Ang pagkunhod sa punoan sa pine usa ka dakong problema sa ekonomiya, ug ang palaaboton sa global nga pagkaylap niini makapabalaka3. Ang mosunod nga mga espisye sa pino kasagarang giatake sa nematode: Pinus densiflora, Pinus sylvestris, Pinus thunbergii, Pinus koraiensis, Pinus thunbergii, Pinus thunbergii, ug Pinus radiata4. Ang pine nematode usa ka seryoso nga sakit nga makapatay sa mga pine tree sulod sa mga semana o mga bulan sa impeksyon. Dugang pa, ang mga pine nematode outbreak kay kasagaran sa lain-laing mga ekosistema, mao nga ang padayon nga mga kadena sa impeksyon natukod1.
Ang Bursaphelenchus xylophilus kay sakop sa superfamily nga Aphelenchoidea ug clade 102.5. Ang nematode mokaon ug fungi ug mosanay diha sa mga tisyu sa kahoy sa mga punoan sa pino, nga nahimong upat ka lain-laing yugto sa ulod: L1, L2, L3, L4 ug usa ka hamtong nga indibidwal1,6. Ubos sa mga kahimtang sa kakulang sa pagkaon, ang pine nematode moagi sa usa ka espesyal nga yugto sa larva - dauer, nga nag-parasitize sa vector niini - ang pine bark beetle (Monochamus alternatus) ug gibalhin sa himsog nga mga punoan sa pino. Sa himsog nga mga host, ang mga nematode dali nga molalin pinaagi sa mga tisyu sa tanum ug mokaon sa mga parenchymatous nga mga selyula, nga nagdala sa daghang mga reaksyon sa hypersensitivity, pagkalaya sa pino ug pagkamatay sa sulod sa usa ka tuig pagkahuman sa impeksyon1,7,8.
Ang biolohikal nga pagkontrol sa mga pine nematode dugay na nga usa ka hagit, nga adunay mga lakang sa pagkuwarentinas sukad pa sa ika-20 nga siglo. Ang mga estratehiya karon sa pagkontrolar sa mga pine nematode nag-una nga naglakip sa kemikal nga mga pagtambal, lakip na ang pagpausok sa kahoy ug pagtanom sa mga nematicides ngadto sa mga punoan sa kahoy. Ang kasagarang gigamit nga nematicides mao ang avermectin ug avermectin benzoate, nga iya sa pamilyang avermectin. Kining mga mahalon nga kemikal epektibo kaayo batok sa daghang matang sa nematode ug gikonsiderar nga luwas sa kinaiyahan9. Bisan pa, ang balik-balik nga paggamit niini nga mga nematicides gilauman nga makamugna og presyur sa pagpili nga hapit siguradong mosangput sa pagtumaw sa resistensyado nga mga nematode sa pino, sama sa gipakita sa daghang mga peste sa insekto, sama sa Leptinotarsa decemlineata, Plutella xylostella ug ang mga nematodes Trichostrongylus colubriformis ug Ostertagia circumcincta nga hinayhinay nga naugmad. avermectins10,11,12. Busa, ang mga pattern sa pagsukol kinahanglan nga regular nga tun-an ug ang mga nemaicide nga masusi kanunay aron makapangita og alternatibo, epektibo sa gasto ug mahigalaon sa kinaiyahan nga mga lakang aron makontrol ang PVD. Sa bag-ohay nga mga dekada, ubay-ubay nga mga tagsulat ang nagsugyot sa paggamit sa mga extract sa tanum, importante nga mga lana ug mga volatiles isip mga ahente sa pagkontrol sa nematode13,14,15,16.
Bag-ohay lang namong gipakita ang nematicidal activity sa indole, usa ka intercellular ug interkingdom signaling molekula, sa Caenorhabditis elegans 17. Ang Indole kay kaylap nga intracellular signal sa microbial ecology, nagkontrol sa daghang mga function nga makaapekto sa microbial physiology, spore formation, plasmid stability, drug resistance, biofilm formation, ug virulence 18, 19. Ang kalihokan sa indole ug ang mga gigikanan niini batok sa ubang mga pathogen nematodes wala pa gitun-an. Niini nga pagtuon, among gisusi ang nematicidal activity sa 34 indoles batok sa pine nematodes ug gipatin-aw ang mekanismo sa aksyon sa labing kusgan nga 5-iodoindole gamit ang microscopy, time-lapse photography, ug molecular docking nga mga eksperimento, ug gisusi ang makahilo nga epekto niini sa mga tanum gamit ang seed germination assay.
Ang taas nga konsentrasyon (> 1.0 mM) sa indole kaniadto gitaho nga adunay nematicidal nga epekto sa nematodes17. Human sa pagtambal sa B. xylophilus (mixed life stages) nga adunay indole o 33 ka lain-laing indole derivatives sa 1 mM, ang mortalidad sa B. xylophilus gisukod pinaagi sa pag-ihap sa buhi ug patay nga mga nematode sa kontrol ug gitambalan nga mga grupo. Lima ka indoles ang nagpakita sa mahinungdanong nematicidal activity; ang pagkaluwas sa wala matambalan nga kontrol nga grupo mao ang 95 ± 7% pagkahuman sa 24 ka oras. Sa 34 ka indoles nga gisulayan, 5-iodoindole ug 4-fluoroindole sa 1 mM maoy hinungdan sa 100% nga mortalidad, samtang ang 5,6-difluoroindigo, methylindole-7-carboxylate, ug 7-iodoindole hinungdan sa gibana-bana nga 50% nga mortalidad (Table 1).
Epekto sa 5-iodoindole sa vacuole formation ug metabolismo sa pine wood nematode. (A) Epekto sa avermectin ug 5-iodoindole sa hamtong nga laki nematodes, (B) L1 stage nematode itlog ug (C) metabolismo sa B. xylophilus, (i) vacuoles wala obserbahan sa 0 h, pagtambal miresulta sa (ii) vacuoles, (iii) akumulasyon sa daghang vacuoles, (iv) fusionswelling sa vacuoles, (iv) fusionswelling. (vi) pagporma sa higanteng mga vacuole. Ang pula nga mga udyong nagpaila sa paghubag sa mga vacuoles, ang asul nga mga udyong nagpaila sa pagsagol sa mga vacuoles ug ang itom nga mga pana nagpakita sa higanteng mga vacuoles. Scale bar = 50 μm.
Dugang pa, kini nga pagtuon naghulagway usab sa sunod-sunod nga proseso sa methane-induced nga kamatayon sa pine nematodes (Figure 4C). Ang methanogenic nga kamatayon usa ka non-apoptotic nga tipo sa cell death nga nalangkit sa pagtipon sa prominenteng cytoplasmic vacuoles27. Ang mga depekto sa morphological nga naobserbahan sa mga pine nematode daw suod nga nalangkit sa mekanismo sa kamatayon nga gipahinabo sa methane. Ang mikroskopikong eksaminasyon sa lain-laing mga panahon nagpakita nga ang higanteng mga vacuole naporma human sa 20 ka oras nga pagkaladlad sa 5-iodoindole (0.1 mM). Ang mga microscopic vacuoles naobserbahan pagkahuman sa 8 ka oras sa pagtambal, ug ang ilang gidaghanon misaka pagkahuman sa 12 ka oras. Daghang dagkong mga vacuole ang naobserbahan pagkahuman sa 14 ka oras. Daghang mga fused vacuoles ang tin-aw nga makita pagkahuman sa 12-16 ka oras nga pagtambal, nga nagpakita nga ang vacuole fusion mao ang sukaranan sa mekanismo sa pagkamatay sa methanogenic. Human sa 20 ka oras, daghang mga higanteng vacuole ang nakit-an sa tibuok ulod. Kini nga mga obserbasyon nagrepresentar sa unang taho sa metuosis sa C. elegans.
Sa 5-iodoindole-treated worms, ang vacuole aggregation ug rupture naobserbahan usab (Fig. 5), ingon nga ebidensya sa worm bending ug vacuole release ngadto sa palibot. Ang pagkabalda sa vacuole nakita usab sa lamad sa kabhang sa itlog, nga kasagarang gipreserbar nga wala'y sulod sa L2 atol sa pagpusa (Supplementary Fig. S2). Kini nga mga obserbasyon nagsuporta sa pagkalambigit sa fluid accumulation ug osmoregulatory failure, ingon man ang reversible cell injury (RCI), sa proseso sa vacuole formation ug suppuration (Fig. 5).
Ang hypothesizing sa papel sa iodine sa naobserbahan nga vacuole formation, among gisusi ang nematicidal activity sa sodium iodide (NaI) ug potassium iodide (KI). Bisan pa, sa mga konsentrasyon (0.1, 0.5 o 1 mM), wala sila makaapekto sa pagkaluwas sa nematode o pagporma sa vacuole (Supplementary Fig. S5), bisan kung ang 1 mM KI adunay gamay nga nematicidal nga epekto. Sa laing bahin, ang 7-iodoindole (1 o 2 mM), sama sa 5-iodoindole, nag-aghat sa daghang mga vacuole ug mga deformasyon sa estruktura (Supplementary Fig. S6). Ang duha ka iodoindoles nagpakita og susama nga phenotypic nga mga kinaiya sa pine nematodes, samtang ang NaI ug KI wala. Makapainteres, ang indole wala mag-aghat sa pagporma sa vacuole sa B. xylophilus sa mga konsentrasyon nga gisulayan (wala gipakita ang datos). Busa, ang mga resulta nagpamatuod nga ang indole-iodine complex maoy responsable sa vacuolization ug metabolismo sa B. xylophilus.
Lakip sa mga indoles nga gisulayan alang sa nematicidal activity, ang 5-iodoindole adunay pinakataas nga slip index nga -5.89 kcal/mol, gisundan sa 7-iodoindole (-4.48 kcal/mol), 4-fluoroindole (-4.33), ug indole (-4.03) (Figure 6). Ang lig-on nga backbone hydrogen bonding sa 5-iodoindole ngadto sa leucine 218 nagpalig-on sa pagbugkos niini, samtang ang tanan nga uban nga indole derivatives nagbugkos sa serine 260 pinaagi sa side chain hydrogen bonds. Lakip sa ubang mga modelo nga iodoindoles, ang 2-iodoindole adunay bili nga -5.248 kcal/mol, nga tungod sa nag-unang hydrogen bond niini sa leucine 218. Ang ubang nailhan nga binding naglakip sa 3-iodoindole (-4.3 kcal/mol), 4-iodoindole (-4.0 kcal/mol), ug (6-2. S8). Kadaghanan sa mga halogenated nga indoles ug indole mismo, gawas sa 5-iodoindole ug 2-iodoindole, nagporma og usa ka bugkos sa serine 260. Ang kamatuoran nga ang hydrogen bonding sa leucine 218 nagpaila sa episyente nga receptor-ligand binding, ingon sa nakita sa ivermectin (Supplementary Fig. S7), nagpamatuod nga ang iodole, sama sa 5-iodole, ug 5-iodole, sama sa 5-iodole. hugot nga igapos sa aktibo nga dapit sa GluCL receptor pinaagi sa leucine 218 (Fig. 6 ug Supplementary Fig. S8). Gisugyot namon nga kini nga pagbugkos gikinahanglan aron mapadayon ang bukas nga istruktura sa lungag sa GluCL complex ug nga pinaagi sa hugot nga pagbugkos sa aktibo nga site sa receptor sa GluCL, 5-iodoindole, 2-iodoindole, avermectin ug ivermectin sa ingon magpadayon nga bukas ang channel sa ion ug gitugotan ang pag-agos sa likido.
Molecular docking sa indole ug halogenated indole sa GluCL. Ang pagbugkos nga mga orientasyon sa (A) indole, (B) 4-fluoroindole, (C) 7-iodoindole, ug (D) 5-iodoindole ligands ngadto sa aktibong dapit sa GluCL. Ang protina girepresentahan sa usa ka ribbon, ug ang backbone hydrogen bonds gipakita ingon nga yellow dotted lines. Ang (A′), (B′), (C′), ug (D′) nagpakita sa mga interaksyon sa katugbang nga mga ligand sa naglibot nga amino acid residues, ug ang side-chain hydrogen bonds gipakita sa pink nga tuldok nga mga pana.
Ang mga eksperimento gihimo aron sa pagtimbang-timbang sa makahilo nga epekto sa 5-iodoindole sa pagtubo sa mga liso sa repolyo ug labanos. Ang 5-iodoindole (0.05 o 0.1 mM) o avermectin (10 μg/mL) gamay ra o walay epekto sa inisyal nga pagturok ug pagtumaw sa plantlet (Figure 7). Dugang pa, wala'y nakita nga mahinungdanong kalainan tali sa rate sa pagtubo sa wala matambalan nga mga kontrol ug mga liso nga gitambalan sa 5-iodoindole o avermectin. Ang epekto sa taproot elongation ug ang gidaghanon sa mga lateral roots nga naporma gamay ra, bisan kung ang 1 mM (10 ka beses nga aktibo nga konsentrasyon) sa 5-iodoindole gamay nga nalangan ang pag-uswag sa lateral nga mga ugat. Kini nga mga resulta nagpakita nga ang 5-iodoindole dili makahilo sa mga selula sa tanum ug dili makabalda sa mga proseso sa pagpalambo sa tanum sa mga konsentrasyon nga gitun-an.
Epekto sa 5-iodoindole sa pagtubo sa liso. Pagtubo, pagturok ug lateral rooting sa B. oleracea ug R. raphanistrum nga mga liso sa Murashige ug Skoog agar medium nga adunay o walay avermectin o 5-iodoindole. Ang pagtubo natala pagkahuman sa 3 ka adlaw nga paglumlum sa 22 ° C.
Kini nga pagtuon nagreport sa daghang mga kaso sa pagpatay sa nematode sa mga indol. Importante, kini ang unang taho sa iodoindole inducing methylation (usa ka proseso tungod sa pagtipon sa gagmay nga mga vacuoles nga anam-anam nga naghiusa ngadto sa higanteng mga vacuoles, nga sa ngadto-ngadto mosangpot sa pagkaguba sa lamad ug kamatayon) sa mga pine needles, nga adunay iodoindole nga nagpakita sa mahinungdanon nga nematicidal properties nga susama sa komersyal nga nematicide avermectin.
Ang mga Indoles kaniadto gikataho nga adunay daghang mga function sa pagsenyas sa mga prokaryote ug eukaryotes, lakip ang pagdili / pagporma sa biofilm, pagkaluwas sa bakterya, ug pathogenicity19,32,33,34. Bag-ohay lang, ang potensyal nga terapyutik nga epekto sa halogenated indoles, indole alkaloids, ug semisynthetic indole derivatives nakadani sa halapad nga research interes35,36,37. Pananglitan, ang mga halogenated nga indoles gipakita nga makapatay sa nagpadayon nga Escherichia coli ug Staphylococcus aureus nga mga selula37. Dugang pa, interes sa siyensya ang pagtuon sa kaepektibo sa mga halogenated indoles batok sa ubang mga espisye, genera, ug gingharian, ug kini nga pagtuon usa ka lakang padulong sa pagkab-ot niini nga katuyoan.
Dinhi, among gisugyot ang usa ka mekanismo alang sa 5-iodoindole-induced lethality sa C. elegans base sa reversible cell injury (RCI) ug methylation (Figures 4C ug 5). Ang mga pagbag-o sa edema sama sa paghubag ug pagkabulok sa vacuolar mga timailhan sa RCI ug methylation, nga gipakita ingon higante nga mga vacuole sa cytoplasm48,49. Ang RCI makabalda sa produksiyon sa enerhiya pinaagi sa pagkunhod sa produksiyon sa ATP, hinungdan sa kapakyasan sa bomba sa ATPase, o pagkabalda sa mga membrana sa selula ug hinungdan sa paspas nga pag-agos sa Na+, Ca2+, ug tubig50,51,52. Ang mga intracytoplasmic vacuoles mitungha sa mga selula sa mananap isip resulta sa fluid accumulation sa cytoplasm tungod sa pag-agos sa Ca2+ ug tubig53. Makapainteres, kini nga mekanismo sa kadaot sa selula mabalik kung ang kadaot temporaryo ug ang mga selula magsugod sa paghimo og ATP sa usa ka piho nga yugto sa panahon, apan kung ang kadaot magpadayon o mograbe, ang mga selula mamatay.54 Gipakita sa among mga obserbasyon nga ang mga nematode nga gitambalan sa 5-iodoindole dili makahimo sa pagpasig-uli sa normal nga biosynthesis human sa pagkaladlad sa mga kahimtang sa stress.
Ang methylation phenotype nga gipahinabo sa 5-iodoindole sa B. xylophilus mahimong tungod sa presensya sa iodine ug sa pag-apod-apod sa molekula niini, tungod kay ang 7-iodoindole adunay gamay nga epekto sa pagpugong sa B. xylophilus kaysa 5-iodoindole (Table 1 ug Supplementary Figure S6). Kini nga mga resulta partially nahiuyon sa mga pagtuon sa Maltese et al. (2014), kinsa nagtaho nga ang translokasyon sa pyridyl nitrogen moiety sa indole gikan sa para- sa meta-posisyon nagwagtang sa vacuolization, pagdugtong sa pagtubo, ug cytotoxicity sa U251 nga mga selula, nga nagsugyot nga ang interaksyon sa molekula nga adunay usa ka piho nga aktibong site sa protina kritikal27,44,45. Ang mga interaksyon tali sa indole o halogenated indoles ug GluCL receptors nga naobserbahan niini nga pagtuon nagsuporta usab niini nga ideya, tungod kay ang 5- ug 2-iodoindole nakit-an nga nagbugkos sa GluCL receptors nga mas kusgan kay sa ubang mga indoles nga gisusi (Figure 6 ug Supplementary Figure S8). Ang iodine sa ikaduha o ikalima nga posisyon sa indole nakit-an nga nagbugkos sa leucine 218 sa GluCL receptor pinaagi sa backbone hydrogen bonds, samtang ang uban nga mga halogenated indoles ug indole mismo nagporma nga huyang nga side-chain nga hydrogen bond nga adunay serine 260 (Figure 6). Busa kami nangagpas nga ang localization sa halogen adunay importante nga papel sa induction sa vacuolar degeneration, samtang ang hugot nga pagbugkos sa 5-iodoindole nagpugong sa ion channel nga bukas, sa ingon nagtugot sa paspas nga pag-agos sa fluid ug pagkaguba sa vacuole. Bisan pa, ang detalyado nga mekanismo sa aksyon sa 5-iodoindole nagpabilin nga mahibal-an.
Sa dili pa praktikal nga paggamit sa 5-iodoindole, ang makahilo nga epekto niini sa mga tanum kinahanglan nga analisahon. Ang among mga eksperimento sa pagtubo sa binhi nagpakita nga ang 5-iodoindole walay negatibong epekto sa pagtubo sa binhi o sa sunod nga mga proseso sa paglambo sa mga konsentrasyon nga gitun-an (Figure 7). Busa, kini nga pagtuon naghatag og basehan sa paggamit sa 5-iodoindole sa ekolohikal nga palibot aron makontrol ang pagkadaut sa mga pine nematode ngadto sa mga pine tree.
Gipakita sa nangaging mga taho nga ang terapiya nga nakabase sa indole nagrepresentar sa usa ka potensyal nga pamaagi aron matubag ang problema sa pagsukol sa antibiotiko ug pag-uswag sa kanser55. Dugang pa, ang mga indoles adunay antibacterial, anticancer, antioxidant, anti-inflammatory, antidiabetic, antiviral, antiproliferative ug antituberculosis nga mga kalihokan ug mahimong magsilbi nga usa ka maayong basehan sa pagpalambo sa droga56,57. Kini nga pagtuon nagsugyot sa unang higayon sa potensyal nga paggamit sa iodine ingon nga usa ka antiparasitic ug anthelmintic ahente.
Ang Avermectin nadiskobrehan tulo ka dekada na ang milabay ug nakadaog sa Nobel Prize niadtong 2015, ug ang paggamit niini isip anthelmintic aktibo gihapon nga nagpadayon. Bisan pa, tungod sa paspas nga pag-uswag sa resistensya sa mga avermectins sa mga nematode ug mga peste sa insekto, usa ka alternatibo, barato, ug mahigalaon nga estratehiya ang gikinahanglan aron makontrol ang impeksyon sa PWN sa mga punoan sa pino. Kini nga pagtuon usab nagtaho sa mekanismo diin ang 5-iodoindole makapatay sa mga pine nematode ug nga ang 5-iodoindole adunay ubos nga toxicity sa mga selula sa tanum, nga nagbukas sa maayong mga prospect alang sa umaabot nga komersyal nga aplikasyon niini.
Ang tanan nga mga eksperimento giaprobahan sa Ethics Committee sa Yeungnam University, Gyeongsan, Korea, ug ang mga pamaagi gihimo sumala sa mga giya sa Ethics Committee sa Yeungnam University.
Ang mga eksperimento sa paglumlum sa itlog gihimo gamit ang natukod nga mga pamaagi43. Aron masusi ang mga rate sa pagpusa (HR), ang 1 ka adlaw nga hamtong nga mga nematode (gibana-bana nga 100 nga mga babaye ug 100 nga mga lalaki) gibalhin sa mga pinggan nga Petri nga adunay sulud nga fungus ug gitugotan nga motubo sa 24 ka oras. Ang mga itlog dayon gilain ug gitambalan sa 5-iodoindole (0.05 mM ug 0.1 mM) o avermectin (10 μg/ml) isip suspension sa sterile distilled water. Kini nga mga suspensyon (500 μl; gibana-bana nga 100 ka mga itlog) gibalhin ngadto sa mga atabay sa usa ka 24-well tissue culture plate ug gilumlom sa 22 °C. Ang L2 nga ihap gihimo pagkahuman sa 24 ka oras sa paglumlum apan giisip nga patay kung ang mga selyula dili molihok kung gipukaw sa usa ka pinong platinum wire. Kini nga eksperimento gihimo sa duha ka yugto, ang matag usa adunay unom ka pagsubli. Ang datos gikan sa duha ka eksperimento gihiusa ug gipresentar. Ang porsyento sa HR gikalkula ingon sa mosunod:
Ang pagka-mortal sa ulod gi-assess gamit ang nauna nga mga pamaagi. Ang mga itlog sa nematode gikolekta ug ang mga embryo gidungan pinaagi sa pagpusa sa sterile distilled water aron makamugna og L2 stage larvae. Ang synchronized larvae (gibana-bana nga 500 nematodes) gitambalan sa 5-iodoindole (0.05 mM ug 0.1 mM) o avermectin (10 μg/ml) ug gipadako sa B. cinerea Petri plates. Human sa 48 ka oras sa paglumlum sa 22 °C, ang mga nematode nakolekta sa sterile distilled water ug gisusi alang sa presensya sa L2, L3, ug L4 nga mga yugto. Ang presensya sa L3 ug L4 nga mga yugto nagpakita sa larval nga pagbag-o, samtang ang presensya sa L2 nga yugto nagpakita nga walay pagbag-o. Nakuha ang mga hulagway gamit ang iRiS ™ Digital Cell Imaging System. Kini nga eksperimento gihimo sa duha ka yugto, ang matag usa adunay unom ka pagsubli. Ang datos gikan sa duha ka eksperimento gihiusa ug gipresentar.
Ang toxicity sa 5-iodoindole ug avermectin sa mga liso gi-assess gamit ang germination tests sa Murashige ug Skoog agar plates.62 B. oleracea ug R. raphanistrum nga mga liso ang unang gituslob sa sterile distilled water sulod sa usa ka adlaw, gihugasan gamit ang 1 ml 100% ethanol, sterilized sa commercial hypo50% sa sodium 1 ml. min, ug gihugasan lima ka beses sa 1 ml sterile nga tubig. Ang sterilized nga mga liso dayon ipilit sa germination agar plates nga adunay sulod nga 0.86 g/l (0.2X) Murashige ug Skoog medium ug 0.7% bacteriological agar nga adunay o walay 5-iodoindole o avermectin. Ang mga plato dayon gilumlom sa 22 ° C, ug ang mga hulagway gikuha human sa 3 ka adlaw nga paglumlum. Kini nga eksperimento gihimo sa duha ka yugto, nga ang matag usa adunay unom ka pagsubli.
Oras sa pag-post: Peb-26-2025